Peningkatan kandungan fenol dan flavonoid pada kalus daun insulin (Tithonia diversifolia (Hemsl.)) secara in vitro melalui pemberian prekursor L-fenilalanin dan L-tirosin

Tithonia diversifolia merupakan tanaman antidiabetes potensial yang kaya akan senyawa fenol dan flavonoid. Penelitian ini bertujuan menganalisis pengaruh L-fenilalanin dan L-tirosin sebagai prekursor terhadap pertumbuhan kalus serta akumulasi total fenol dan flavonoid secara in vitro. Eksplan daun muda T. diversifolia dikultur pada media Murashige dan Skoog (MS) yang ditambahkan 4 mg/L NAA dan 0,5 mg/L BAP untuk induksi kalus. Kalus berumur 35 hari dengan berat 200 mg kemudian disubkultur pada media MS yang mengandung L-fenilalanin (1; 1,5; 2; dan 2,5 mg/L), L-tirosin (1; 1,5; 2; dan 2,5 mg/L), serta kombinasi L-fenilalanin 1,5 mg/L + L-tirosin 2 mg/L. Kultur diinkubasi pada suhu 22–26°C selama 21 hari dalam kondisi terang. Analisis total fenol dan flavonoid dilakukan menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa penambahan prekursor meningkatkan akumulasi metabolit sekunder dan menghasilkan kalus remah berwarna kuning hingga kuning keunguan dengan peningkatan biomassa dibandingkan tanpa penambahan prekursor. Kadar total fenol tertinggi diperoleh pada perlakuan L-fenilalanin 2,5 mg/L sebesar 10,82 mg GAE/g, sedangkan kadar total flavonoid tertinggi diperoleh pada perlakuan L-tirosin 2,5 mg/L sebesar 14,74 mg QE/g. Penelitian ini menunjukkan bahwa penggunaan prekursor efektif meningkatkan produksi metabolit sekunder pada kultur kalus Tithonia diversifolia serta mendukung pengembangan bahan baku alami untuk fitofarmaka antidiabetes yang berkelanjutan.